Генетическое конструирование рекомбинантого штамма Bacillussubtilis , продуцирующего протективный антиген сибиреязвенного микроба

  • Н. В. Онучина
  • А. В. Кузнецовский
  • А. А. Воробьев
  • А. В. Филиппов
Ключевые слова: Bacillus subtilis, ген pag Bacillus anthracis, клонирование, протективный антиген сибиреязвенного микроба, челночный (B. subtilis/E. coli) вектор pHT43

Аннотация

Сибирская язва является особо опасным зооантропонозным заболеванием, которое характеризуется тяжестью течения и высокой летальностью. Споры Bacillus anthracis обладают способностью длительно сохраняться в окружающей среде. На эндемичной территории сибиреязвенная инфекция может стать причиной массового заболевания людей и сельскохозяйственных животных. Кроме того, существует угроза применения биологических средств на основе возбудителя сибирской язвы террористическими организациями. Эпидемиологическое благополучие по сибирской язве напрямую зависит от вакцинации восприимчивых животных и населения групп риска. Многие из существующих сибиреязвенных вакцинных штаммов характеризуются низким уровнем продукции протективного антигена и высокой реактогенностью. Перспективным направлением создания вакцинных препаратов нового поколения является клонирование отдельных детерминант иммуногенности сибиреязвенного микроба в гомо- и гетерологичных живых системах с целью создания высокоэффективных продуцентов протективного антигена B. anthracis. Цель работы заключалась в проведении исследований по получению рекомбинантного штамма Bacillus subtilis, продуцирующего протективный антиген сибиреязвенного микроба, перспективный для использования в технологии химических сибиреязвенных вакцин. В статье представлены результаты исследований по получению рекомбинантного штамма B. subtilis. На основе челночного вектора рHТ43 сконструирована плазмида pНТ43PA, содержащая ген pag синтеза протективного антигена сибиреязвенного микроба и стабильно функционирующая в клетках рекомбинантного штамма Amy21(pHT43PA) B. subtilis. В ходе исследований установлено, что микробные клетки рекомбинантного штамма Amy21(pHT43PA) B. subtilis обеспечивают продукцию иммунологически активного протективного антигена в количестве, не уступающем сибиреязвенным вакцинным штаммам. Полученные в ходе работ данные, а также безопасность, неприхотливость, изученность В. subtilis позволяют предложить данный рекомбинантный штамм для дальнейшего исследования в качестве продуцента сибиреязвенного протективного антигена, перспективного для использования в качестве химической составляющей сибиреязвенных вакцин.

Опубликован
2018-09-06
Раздел
Биологическая безопасность и защита от биологических угроз